Proteomická analýza využívající spojení kapalinové chromatografie s hmotnostní spektrometrií umožňuje studium buněčných signálních drah využívajících například receptor tyrosin kinázy. K přípravě kapilárních chromatografických kolon lze s výhodou využít monolitické stacionární fáze připravené pomocí radikálové polymerace uvnitř křemenné kapiláry. V rámci diplomové práce vypracujte literární rešerši týkající se využití polymerních monolitických stacionárních fází v proteomické analýze. Zaměřte se zejména na vztah mezi experimentálními podmínkami jejich přípravy a separačními vlastnostmi v gradientové eluci peptidů. Pomocí metakrylátových nebo styrenových monomerů připravte monolitické kapilární kolony v kapilárách o různých vnitřních průměrech. Na těchto kolonách studujte vliv povrchové chemie, vnitřního průměru kolony a experimentálních podmínek gradientu na kvalitu separace vybraných peptidových standardů v kapalinové chromatografii s UV detekcí. K charakterizaci kolon využijte popis kinetických vlastností separace. Na základě dosažených výsledků vyberte optimální kolonu umožňující separaci modelového vzorku proteolytických peptidů. Vybranou kolonu využijte pro podrobnou proteomickou charakteristiku signálních drah buněčných lyzátů pomocí spojení kapalinové chromatografie s hmotnostní spektrometrií. Získané výsledky porovnejte s informacemi dosaženými pomocí komerčně dostupných kapilárních chromatografických kolon. Cíle práce: 1) Připravit monolitické kapilární kolony 2) Optimalizovat podmínky přípravy monolitických kapilárních kolon s ohledem na kapacitu separace 3) Využít připravené kapilární kolony v proteomické analýze buněčných signálních drah