Disertační práce

Chování alternativních DNA struktur na elektricky nabitých površích

Behavior of alternative DNA structures at electrically charged surfaces

Mgr. Daniel Dobrovodský
Anotace

Kromě kanonické dvoušroubovice může DNA tvořit řadu alternativních sekundárních struktur. Mezi jeden z nejvíce zkoumaných typů těchto struktur patří tetrahelikální G-kvadruplexy (G4). G4 struktury vznikají spojením čtyř úseků po sobě jdoucích guaninů z jednoho nebo několika řetězců DNA, které se organizují do čtvercových planárních guaninových tetrád spojených sítí Hoogsteenových vodíkových vazeb. …více

Abstract

In addition to the canonical double helix, DNA can adopt a variety of alternative secondary structures. One of the most widely researched type of these structures include the tetrahelical G-quadruplexes (G4). G4 structures arise from the associations of four tracts of consecutive guanines from one or several DNA strands, which organise into stacks of square planar guanine tetrads connected by a network …více

Zadání práce
Elektrochemické metody jsou využívány jako citlivý nástroj pro analýzu struktury nukleových kyselin. Jsou vhodné nejen pro rozlišení „nativní“ (dvouřetězcové) a „denaturované“ (jednořetězcové) DNA, ale také pro citlivou detekci relativně malých změn v konformaci DNA, poškození DNA nebo interakcí DNA [1,2]. V literatuře [5] se nedávno objevily studie chování alternativních struktur DNA, jako jsou guaninové kvaruplexy (G4) [3,4]. Nedávné výsledky získané skupinou školitele [6] naznačují, že tvorba G4 významně ovlivňuje elektrochemické chování příslušných oligonukleotidů (ON). V rámci této dizertační práce bude provedena systematická studie elektrochemických a adsorpčně/desorpčních vlastností oligonukleotidů obsahujících úseky bohaté na guanin, které jsou vhodné pro tvorbu G4, nebo na cytosin, které často tvoří tzv. i-motivy. Sekvence modelových ON budou buď odvozeny z přirozených úseků DNA (jako jsou telomerní DNA repetice) nebo navrženy specificky pro studium příslušného jevu (např. efekt délky a sekvence smyček a ocásků ohraničujících úseky schopné tvorby G4/i-motivu na stabilitu těchto struktur a/nebo na jejich adsorpci na povrch elektrody). Bude zkoumán vliv podmínek, jako jsou iontové podmínky, přítomnost vybraných ligandů vázajících se na příslušné struktury a další. Elektrochemická měření budou doplněna dalšími metodami, jako jsou CD spektroskopie a elektroforetické metody. [1] E. Paleček, M. Bartošík, Electrochemistry of Nucleic Acids, Chem Rev 112 (2012) 3427-3481. [2] M. Hocek, M. Fojta, Nucleobase modification as redox DNA labelling for electrochemical detection, Chem Soc Rev 40 (2011) 5802-5814. [3] V. Brazda, L. Haronikova, J.C.C. Liao, M. Fojta, DNA and RNA quadruplex-binding proteins, International journal of molecular sciences 15 (2014) 17493-17517. [4] J. Kypr, I. Kejnovská, D. Renčiuk, M. Vorlíčková, Circular dichroism and conformational polymorphism of DNA, Nucleic Acids Res. 37 (2009) 1713–1725. [5] A.-M. Chiorcea-Paquim, A.M. Oliveira-Brett, Redox behaviour of G-quadruplexes, Electrochimica Acta 126 (2014) 162-170. [6] P. Vidláková, H. Pivoňková, I. Kejnovská, L. Trnková, M. Vorlíčková, M. Fojta, L. Havran, G-quadruplex-based structural transitions in 15-mer DNA oligonucleotides varying in lengths of internal oligo(dG) stretches detected by voltammetric techniques, submitted (2015).
Práce zkontrolována:
10. 7. 2023 16:39, doc. RNDr. Miroslav Fojta, CSc., učo 31900
Plný text práce
10,9 MB / soubor PDF
Jazyk práce
angličtina angličtina
Termín obhajoby
28. 8. 2023
Práce byla úspěšně obhájena

Vedoucí

doc. RNDr. Miroslav Fojta, CSc., učo 31900
NCBR PřF MU

Oponenti

doc. Mgr. Lukáš Trantírek, Ph.D., učo 8725
NekGen CSB CEITEC MU
prof. Ing. Jan Vacek, Ph.D.
abs PřF MU, LF, UP v Olomouci

Konzultanti

RNDr. Aleš Daňhel, Ph.D.
NCBR PřF MU
Mgr. Daniel Renčiuk, Ph.D., učo 183149
NCBR PřF MU

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.
  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.
  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.
  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.
  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.