Bakalářská práce

Stanovení aminokyselin pomocí plynové chromatografie v kombinaci s plamenově ionizačním detektorem – optimalizace metody

Determination of amino acids using GC-FID - optimization of method

Šárka Šefraná
Anotace

V této práci se věnujeme stanovení vybraných aminokyselin, konkrétně alaninu, lysinu, serinu, methioninu, leucinu, kyseliny asparagové, asparaginu, glycinu, fenylalaninu a norvalinu. Byl vytvořen přehled derivatizačních metod pro úpravu aminokyselin a následně vybrána metoda za použití specifických reakcí alkyl chloroformiátů, která byla optimalizována. K analýze byla použita plynová chromatografie …více

Abstract

In this thesis we study the determination of selected amino acids, concretely alanine, lysine, serine, methionine, leucine, aspartic acid, asparagine, glycine, phenylalanine and norvaline. There has been created an overview of derivatization methods for amino acids modification and subsequently an optimized method using alkyl chloroformates specific reactions has been chosen. Gas chromatography with …více

Zadání práce
Všeobecným trendem v biotechnologiích je pěstování buněk v uměle vytvořeném prostředí. Pro správnou funkci buněk v takovém prostředí je nutné sledovat změny v rámci metabolických přeměn, které se odráží ve složení živného média. Mezi metabolity, které je nutné sledovat, patří také aminokyseliny. Jednou z možností, jak stanovit aminokyseliny, je využití standardní metody, a to v našem případě plynové chromatografie ve spojení s plamenově-ionizačním detektorem (GC-FID). Většina analyzovaných metabolitů je polární povahy, tudíž přímé stanovení pomocí GC-FID je výrazně omezeno, vzhledem k nízké volatilitě těchto látek. V takovém to případě se využívá různých derivatizačních postupů, které tyto látky převádí na látky s vyšší volatilitou, což už vyhovuje podmínkám stanovení pomocí GC-FID. Cílem této práce bude získat přehled (literární rešerše) o možnostech modifikace aminokyselin pro stanovení pomocí GC-FID, optimalizovat postup derivatizace vybraných aminokyselinových standardů a jejich detekci na GC-FID. Aminokyseliny se budou modifikovat pomocí alkychloroformiátů. V rámci oddělení derivatizovaných aminokyselin od zbylé reakční směsi bude testována extrakce kapalina-kapalina. Následně v rámci chromatografické analýzy budou jednotlivé aminokyseliny charakterizovány pomocí retenčních časů, bude také pro jednotlivé aminokyseliny stanoven limit detekce a vytvořena kalibrační křivka.
Práce zkontrolována:
15. 5. 2014 10:11, Mgr. Jiří Žeravík, Ph.D.
Plný text práce
799,2 KB / soubor PDF
Jazyk práce
čeština čeština
Termín obhajoby
9. 6. 2014
Práce byla úspěšně obhájena

Vedoucí

Mgr. Jiří Žeravík, Ph.D.
abs PřF MU

Oponent

Mgr. Aleš Mádr, Ph.D.

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.
  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.
  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.
  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.
  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.