Diplomová práce

Využití kapilární elektroforézy pro stanovení aminokyselin a peptidů

Determination of amino acids and peptides by capillary electrophoresis

Bc. Pavel Musil, učo 357205
Anotace

Tato práce se zabývá vývojem metod pro stanovení aminokyselin a peptidů pomocí kapilární elektroforézy se spektrofotometrickou a fluorescenční detekcí. Pro UV-Vis detekci jsou aminokyseliny derivatizovány aromatickým činidlem ortho-ftalaldehydem, čímž vzniká isoindolin-1-onový (ftalimidinový) derivát, jehož výhodou je vysoká stabilita i při pokojové teplotě. Pro syntézu ftalimidinových derivátů jsou …více

Abstract

This work deals with the development of methods for determination of amino acids and peptides by capillary electrophoresis using spectrophotometric and fluorescence detection. For UV-Vis detection, amino acids are derivatized by aromatic reagent o-phthalaldehyde producing isoindolin-1-on (phthalimidine) derivatives that are stable even at room temperature. Two ways of synthesis are proposed. One approach …více

Klíčová slova
Kapilární elektroforéza Aminokyseliny Peptidy Derivatizace Capillary electrophoresis Amino acids Peptides Derivatization
Zadání práce
Analýza nízkomolekulárních látek poskytuje informace nezanedbatelného významu k pochopení fyziologických stavů organismu, studiu enzymové kinetiky, stanovení vazebných konstant nízkomolekulárních látek s proteiny a jiné. Při analýze komplexních vzorků biologického původu je nutné zajistit dostatečnou selektivitu stanovení, aby matrice vzorku neměla výrazných vliv na správnost stanovení. Toho lze dosáhnout využitím specifických interakcí studovaných látek s protilátkami nebo enzymy. Při sledování více látek současně je však výhodnější využít účinné separační techniky jako jsou kapalinová chromatografie nebo kapilární elektroforéza. Detekce pak může být zvolena v závislosti na povaze studované látky a nároků na citlivost stanovení, např. UV-Vis spektrofotometrie, fluorimetrie, konduktometrie, případně hmotnostní spektrometrie umožňující kromě detekce látek také jejich identifikaci na základě měrného náboje (m/z) a charakteru fragmentace. Cílem diplomové práce je využít kapilární elektroforézu k různých bioanalytickým účelům. Těžiště práce by se mělo týkat stanovení aminokyselin a peptidů pomocí laserem indukované fluorescence. Jelikož aminokyseliny a peptidy obecně nefluoreskují, je nutné také zvládnou techniku derivatizace těchto látek pomocí vhodného fluoroforu. Derivatizační reakce by měla být ideálně jednoduchá a snadno automatizovatelná.
Administrativní informace
Práce zkontrolována:
5. 6. 2017 05:01, prof. RNDr. Zdeněk Glatz, CSc., učo 1865
Plný text práce
3,2 MB / soubor PDF
Přílohy (1)
Jazyk práce
čeština čeština
Termín obhajoby
5. 6. 2017
Práce byla úspěšně obhájena

Vedoucí

prof. RNDr. Zdeněk Glatz, CSc., učo 1865
ÚBioch Chem PřF MU

Oponent

doc. RNDr. Josef Tomandl, Ph.D., učo 47
BiochemÚ Teorie LF MU

Konzultant

Mgr. Aleš Mádr, Ph.D.
ÚBioch Chem PřF MU

Literatura

  • Handbook of capillary and microchip electrophoresis and associated microtechniques. Edited by James P. Landers. 3rd ed. Boca Raton: CRC Press, 2008, xxi, 1567. ISBN 9780849333293.
Citovat tuto práci
Masarykova univerzita Přírodovědecká fakulta
Studijní program
Biochemie
Obor

Práce na příbuzné téma

Seznam prací, které mají shodná klíčová slova.

Podobné práce

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.

  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.

  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.

  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.

  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.