Bakalářská práce

Optimalizace TR-FRET stanovení intracelulárního cAMP v lidských neutrofilech ovlivněných forskolinem a jeho deriváty

Optimization of TR-FRET measurement of intracellular cAMP in human neutrophils treated with forskolin or its derivatives

Adéla Hronová
Anotace

Tato práce se zabývá optimalizací stanovení intracelulárního cyklického AMP (cAMP) metodou TR-FRET v lidských neutrofilech, ve kterých koncentrace cAMP moduluje jejich antimikrobiální procesy zahrnující adhezi, chemotaxi a oxidační vzplanutí. cAMP je v buňkách tvořen z ATP enzymem adenylylcyklázou (AC) a jedná se o významného sekundárního posla v buněčné signalizaci. Aktivita AC je stimulována forskolinem …více

Abstract

In this thesis we studied the optimization of the determination of intracellular cyclic AMP (cAMP) by TR-FRET in human neutrophils, in which cAMP levels modulate antimicrobial mechanisms including adhesion, chemotaxis and respiratory burst. cAMP is synthesized from ATP by an enzyme adenylyl cyclase (AC) in the cells and it is one of the most important second messenger in cell signalling. AC activity …více

Zadání práce
Cílem bakalářské práce je optimalizace stanovení intracelulárního cyklického AMP (cAMP) v lidských neutrofilech a následně testování forskolinu a jeho derivátů na tvorbu cAMP. Adenylylcyklázy 1-8 jsou membránové enzymy zodpovědné za tvorbu cAMP, který je významným sekundárním poslem v buňkách. Exprese jednotlivých izoforem je buněčně a orgánově specifická. Student se po teoretickém seznámení s tématem a vypracováním literární rešerše naučí metodiku Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer (TR-FRET). Dále zvládne izolaci lidských neutrofilů z krve dobrovolných dárců. Je vyžadována aktivní účast studenta na plánování a realizaci experimentů s pravidelnou docházkou do laboratoře. Zásady pro vypracování: 1. Vypracování literární rešerše - imunitní systém a role neutrofilů - význam adenylylcykláz v buněčném signalování s důrazem na neutrofily - charakterizace jednotlivých izoforem adenylylcyklázy - TR-FRET měření intracelulárního cAMP 2. Vypracování protokolu na stanovení cAMP pomoci TR-FRET 3. Stanoveni tvorby cAMP v izolovaných neutrofilech ovlivněných forskolinem a jeho deriváty 4. Vypracování bakalářské práce
Práce zkontrolována:
12. 5. 2016 16:27, Mgr. Tomáš Perečko, Ph.D.
Plný text práce
720,7 KB / soubor PDF
Jazyk práce
čeština čeština
Termín obhajoby
13. 6. 2016
Práce byla úspěšně obhájena

Vedoucí

Mgr. Tomáš Perečko, Ph.D.

Oponent

Mgr. Aneta Svobodová, učo 55156

Konzultant

prof. Mgr. Lukáš Kubala, Ph.D., učo 7056
ÚEB Biol PřF MU

  • Přidání souboru

    Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.
  • Další operace se soubory

    Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.
  • Pohled pro experty

    Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.
  • Vyhledávání souborů

    Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.
  • Rychlý přístup k souborům

    Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.