Během spermatogeneze dochází v mužských zárodečných buňkách k reorganizaci chromatinu, přičemž je většina histonů nahrazena protaminy, které zajistí sbalení genomu do kondenzovaného jádra v hlavičce spermie. V remodelaci chromatinu hrají důležitou úlohu histonové varianty a posttranslační modifikace histonů (hPTM). Defekty ve výměně variant či hPTM mohou vést k azoospermii, oligospermii či teratozoospermii, které jsou podstatou mužské neplodnosti. Protaminy a histony tak reprezentují důležité epigenetické znaky, které mohou sloužit jako další diagnostická kritéria v klinických laboratořích. Cílem diplomové práce bude charakterizace histonů ve spermatických buňkách. Student provede izolaci histonů ze vzorků vybraných pacientů s poruchou mužské plodnosti a zdravých jedinců. Pomocí SDS-PAGE zhodnotí kvalitu izolace a porovná profil histonového extraktu mezi jednotlivými vzorky. Dále provede přípravu vzorků pro LC-MS/MS analýzu zahrnující chemickou derivatizaci aminoskupin. Z hmotnostně-spektrometrických dat student vyhodnotí zastoupení posttranslačních modifikací u jednotlivých vzorků. Diplomová práce bude vypracována na pracovišti Výzkumná skupina – Proteomika. Literatura: Krejčí, J., Stixová, L., Pagáčová, E., Legartová, S., Kozubek, S., Lochmanová, G., Zdráhal, Z., Sehnalová, P., Dabravolski, S., Hejátko, J. et al. (2015). Post-Translational Modifications of Histones in Human Sperm. J Cell Biochem 116, 2195-209. Wang, T., Gao, H., Li, W. and Liu, C. (2019). Essential Role of Histone Replacement and Modifications in Male Fertility. Front Genet 10, 962.