PřF:Bi4030c Molekulární biologie - cv. - Informace o předmětu
Bi4030c Laboratorní cvičení z molekulární biologie pro biochemiky
Přírodovědecká fakultapodzim 2023
- Rozsah
- 0/3/0. 3 kr. Ukončení: z.
- Vyučující
- Mgr. Tibor Botka, Ph.D. (cvičící)
Ing. Sylva Koudelková, Ph.D. (cvičící)
Mgr. Ing. Eliška Kučerová (pomocník) - Garance
- prof. RNDr. Roman Pantůček, Ph.D.
Ústav experimentální biologie – Biologická sekce – Přírodovědecká fakulta
Kontaktní osoba: Mgr. Tibor Botka, Ph.D.
Dodavatelské pracoviště: Ústav experimentální biologie – Biologická sekce – Přírodovědecká fakulta - Rozvrh seminárních/paralelních skupin
- Bi4030c/01_1: Čt 14:00–19:50 D36/216, T. Botka
Bi4030c/01_2: Čt 11:30–17:20 D36/216, T. Botka, S. Koudelková
Bi4030c/02_1: Čt 8:00–13:50 D36/216, S. Koudelková
Bi4030c/03_1: St 8:00–13:50 D36/216, S. Koudelková
Bi4030c/03_2: St 8:00–13:50 D36/216, S. Koudelková - Předpoklady
- ( Bi4020 Molekulární biologie || NOW ( Bi4020 Molekulární biologie )) && ( Bi4030 Úvod do metod mol. biol. || NOW ( Bi4030 Úvod do metod mol. biol. ))
Znalost molekulární struktury nukleových kyselin a genomu. Znalost základních mikrobiologických technik jako kultivace bakterií a stanovení titru bakteriální suspenze. Znalost výpočtů složení chemických roztoků. - Omezení zápisu do předmětu
- Předmět je určen pouze studentům mateřských oborů.
- Mateřské obory/plány
- předmět má 7 mateřských oborů, zobrazit
- Cíle předmětu
- Cílem předmětu je naučit studenty provádět základní metody molekulární biologie. Obsahuje praktické úlohy sloužící k osvojení si základních metodických postupů, především izolace a manipulace s nukleovými kyselinami.
- Výstupy z učení
- Student bude po absolvování předmětu schopen:
izolovat plazmidovou DNA v dostatečné kvalitě a množství;
analyzovat izolovaný genetický materiál základními molekulárně biologickými metodami, jako je štěpení restrikčními endonukleázami a ELFO;
připravit dostatečné množství amplikonu genu zájmu pomocí PCR;
vytvořit konstrukt vektorového plazmidu a inzertu genu zájmu a provést transformaci kompetentních buněk;
využít teoretické znalosti dalších metod a principů v následné laboratorní praxi - Osnova
- 1. Význam a příprava roztoků používaných v molekulární biologii.
- 2. Izolace plazmidového vektoru (pUC18, pBluescript). Stanovení čistoty a koncentrace DNA.
- 3. Štěpení DNA restrikčními endonukleázami a agarózová gelová elektroforéza DNA.
- 4. Konstrukce restrikční mapy, izolace DNA z gelů.
- 5. Klonování ve vektorech řady pUC, transformace, selekce klonů.
- 6. Ultracentrifugace v hustotním gradientu.
- 7. Izolace bakteriální (genomové) DNA pro DNA fingerprinting.
- 8. PCR (polymerázová řetězová reakce) a její modifikace PCR-RFLP, AP-PCR.
- Literatura
- SAMBROOK, J., E.F. FRITSCH a T. MANIATIS. Molecular Cloning. A laboratory Manual. Second Edition. Cold Spring Harbor: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989. ISBN 0-87969-309-6. info
- Výukové metody
- Praktická výuka probíhá v laboratoři molekulární biologie v pětihodinových blocích, půl semestru pro každou seminární skupinu. Studenti pracují podle předem prostudovaných protokolů.
- Metody hodnocení
- Pro získání zápočtu je vyžadována 100% účast na praktických cvičeních, vypracování souhrnného protokolu, jehož součástí jsou také prakticky orientované otázky, na které je potřeba správně odpovědět.
- Navazující předměty
- Další komentáře
- Studijní materiály
Předmět je vyučován každoročně. - Nachází se v prerekvizitách jiných předmětů
- Statistika zápisu (podzim 2023, nejnovější)
- Permalink: https://is.muni.cz/predmet/sci/podzim2023/Bi4030c