Prvním a rychlost limitujícím krokem v biosyntéze katecholaminů je přeměna aminokyseliny L-tyrosinu na L-DOPA. Tento krok je katalyzován enzymem tyrosin hydroxylasou, jejiž katalytická aktivita je regulována fosforylací serinových reziduí na N-terminálním konci. Vazba 14-3-3 proteinu na fosforylované rezidua vede k aktivaci a stabilizaci enzymu. Cílem této diplomové práce je určení struktury komplexu fosforylované tyrosin hydroxylasy se 14-3-3. Hlavní metoda pro zjištění struktury bude kryo-elektronová mikroskopie s důrazem na optimalizaci podmínek pro kovalentní stabilizaci komplexu, jelikož mnoho experimentů prokázalo, že samotný komplex není stabilný v koncentracích vhodných pro elektronovou mikroskopii. Tato práce může být vypracována v českém, slovenském, nebo anglickém jazyce. Literatura: (1) Kleppe, Rune, Sara Rosati, Ana Jorge-Finnigan, Sara Alvira, Sadaf Ghorbani, Jan Haavik, José María Valpuesta, Albert J. R. Heck, and Aurora Martinez. “Phosphorylation Dependence and Stoichiometry of the Complex Formed by Tyrosine Hydroxylase and 14-3-3g.” Molecular and Cellular Proteomics: MCP 13, no. 8 (August 2014): 2017–30. (2) Kleppe, Rune, Karen Toska, and Jan Haavik. “Interaction of Phosphorylated Tyrosine Hydroxylase with 14-3-3 Proteins: Evidence for a Phosphoserine 40-dependent Association.” Journal of Neurochemistry 77, no. 4 (May 15, 2001): 1097–1107. (3) Ghorbani, Sadaf, Agnete Fossbakk, Ana Jorge-Finnigan, Marte I. Flydal, Jan Haavik, and Rune Kleppe. “Regulation of Tyrosine Hydroxylase Is Preserved across Different Homo- and Heterodimeric 14-3-3 Proteins.” Amino Acids 48, no. 5 (May 2016): 1221–29. (4) Fujisawa, Hitoshi, and Sachiko Okuno. “Regulatory Mechanism of Tyrosine Hydroxylase Activity.” Biochemical and Biophysical Research Communications 338, no. 1 (December 2005): 271–76.